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9ª PRÁCTICA

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25/11/19 PRÁCTICA Nº9: "DETERMINACIÓN DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS ABO/Rh COMBINADO CON LA PRUEBA INVERSA O GRUPO SÉRICO" INTRODUCCIÓN Los antisueros anti-A y anti-B son necesarios, para demostrar la presencia o ausencia de los antígenos A/B en hematíes humanos. La determinación de los grupos sanguíneos ABO requiere la realización de una contraprueba serológica o grupo inverso con plasma o suero para confirmar los resultados obtenidos en la prueba hemática. Para la contraprueba serológica se utilizan hematíes con una especificidad antígeno-ABO conocida, para detectar la presencia o ausencia en el plasma o suero de las isoaglutininas anti-A y anti-B. Una discrepancia entre la determinación del antígeno y la contraprueba exigen ampliar el estudio. La tarjeta ID-Card "DiaClon ABO/D + Reverse Grouping" permite en una ID-tarjeta determinar el grupo hemático y el grupo sérico para ABO, así como la determinación del antígeno RhD. REACTIVOS La tarjeta ID-Card "Di...

8ª PRÁCTICA

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22/11/19 PRÁCTICA Nº8: "DETERMINACIÓN CELULAR DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh EN TUBO" OBJETIVOS Determinar los grupos sanguíneos del sistema ABO. Determinar el Rh (Ag D). Observar la presencia de aglutinación en el tubo. MATERIAL NECESARIO Gradilla, parafilm, tubo de hemólisis y 6 tubos de ensayo de 5 mL cada uno. Pipeta Pasteur y dispensador de suero fisiológico (SF). Micropipeta automática de 100-1000 microlitros y puntas de plástico desechables. Centrífuga y visualizador. REACTIVOS SF. Anti-A. Anti-B. Anti-AB (actúa como control). Anti-D. Autocontrol Rh. MUESTRA Sangre anticoagulada con EDTA. APARATOS Baño termostático. Centrífuga. Visualizador. PRECAUCIONES Termostatar los reactivos a temperatura ambiente durante unos minutos antes de su utilización. Esperar 2 minutos para comprobar las posibles reacciones débiles. Es conveniente realizar un lavado de hematíes para evitar interferencias que puedan ocasionar falsos resultados. ...

7ª PRÁCTICA

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22/11/19 PRÁCTICA Nº7: "DETERMINACIÓN CELULAR DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh EN PORTAOBJETOS" OBJETIVOS Determinar el grupo sanguíneo del sistema ABO. Determinar el grupo Rh (antígeno [Ag] D). Observar la presencia de aglutinación en portaobjetos. MATERIAL NECESARIO Portaobjetos (o tarjeta blanco), rotulador y pipeta Pasteur. Palillos mezcladores y visualizador de aglutinación. REACTIVOS Anti-A (A). Anti-B (B). Anti-AB (AB) (actúa como control). Anti-D (D). Autocontrol Rh (CD). MUESTRA Sangre anticoagulada con EDTA. PRECAUCIONES Termostatar los reactivos a temperatura ambiente durante unos minutos antes de su utilización. Esperar 2 minutos para comprobar las posibles reacciones débiles. Cambiar de palillo mezclador para cada reactivo. Expresar los resultados del sistema Rh con letras para no crear confusiones: Rh positivo (Rh +) "POS" y Rh negativo (Rh -) "NEG". PROCEDIMIENTO Marcar con un rotulador sobre el vidrio d...

6ª PRÁCTICA

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18/10/19 PRÁCTICA Nº6: "COLORANTE WRIGHT" PRINCIPIO DEL MÉTODO Los colorantes tipo Romanowsky están formados por Azul de Metileno y sus derivados oxidados, colorantes básicos, y el colorante ácido Eosina. Los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y proteínas ácidas que se tiñen de un color rojo púrpura mas o menos intenso, mientras que la eosina se une a la hemoglobina, componentes básicos de las estructuras celulares y los gránulos de los eosinófilos. El balance entre el azul de metileno y sus derivados oxidados y entre estos y la Eosina, proporciona una tonalidad más o menos azul y una mayor o menor intensidad en la coloración, que son característicos de cada tipo de colorante Giemsa, May-Grünwald o Wright. OBJETIVO Visualizar la morfología de las células sanguíneas y así poder identificarlas y diferenciarlas. UTILIDAD Se emplea para la tinción de células sanguíneas y de médula ósea. REAC...

5ª PRÁCTICA

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18/10/19 PRÁCTICA Nº5: "MAY-GRüNWALD-GIEMSA" PRINCIPIO DEL MÉTODO Los colorantes tipo Romanowsky están formados por Azul de Metileno y sus derivados oxidados, colorantes básicos, y el colorante ácido Eosina. Los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en basófilos y proteínas ácidas que se tiñen de un color rojo púrpura más o menos intenso. La Eosina se une a la hemoglobina, a los componentes básicos de las estructuras celulares y a los gránulos de los eosinófilos. El balance entre el azul de metileno y sus derivados oxidados y entre estos y la Eosina, proporciona una tonalidad más o menos azul y una mayor o menor intensidad en la coloración, que son característicos de cada tipo de colorante Giemsa, May-Grünwald o Wright. UTILIDAD Para la tinción de células sanguíneas y de médula ósea. Algunos autores utilizan la coloración compuesta de May-Grünwald-Giemsa para la tinción de parásitos en sangre. OBJETIVO Teñ...

4ª PRÁCTICA

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14/10/19 PRÁCTICA Nº4: "PANOPTICO RÁPIDO" PRINCIPIO Los colorantes Panóptico Rápido constituyen un sistema de tinción diferencial de los elementos formes de la sangre, que combina la policromía y calidad de los métodos clásicos (May Grünwald, Giemsa) con una gran rapidez de ejecución (tan solo 15 segundos). OBJETIVO Teñir las diferentes células sanguíneas del frotis sanguíneo para identificarlas y visualizar su morfología. MATERIAL NECESARIO Frotis sanguíneos realizados en la práctica anterior. Pinzas metálicas. 3 cubetas Wertheim. Papel de filtro. Agua. Microscopio óptico y aceite de inmersión.  REACTIVOS A. Panóptico Rápido Nº1:  Composición: Disolución metanólica de colorante de triarilmetano.   B. Panóptico Rápido Nº2: Composición: Disolución acuosa tamponada de xanteno. C. Panóptico Rápido Nº3: Composición: Disolución acuosa tamponada de colorantes derivados de la tiazina. REACTIVO DE TRABAJO Todos los reactivos están lis...