3ª PRÁCTICA

14/10/19
PRÁCTICA Nº 3: "FROTIS SANGUÍNEOS"

FUNDAMENTO
Una extensión ó frotis sanguíneo consiste en recubrir parcialmente un portaobjetos con una
gota de sangre de tal manera que las células de ésta se dispongan formando una sola capa de ellas.
Es una técnica muy utilizada en hematológica que nos permite obtener una información muy
valiosa, tanto del la fórmula leucocitaria como del estudio de la morfología de las células.
El anticoagulante de elección es el EDTA. La heparina no debe usarse para la tinción de
células sanguíneas porque favorece la agregación de las plaquetas. Además favorece la aparición de
un refuerzo de tonalidad azul de las tinciones cuando se emplea la coloración panóptica.

FINALIDAD DE LAS EXTENSIONES

• Estudiar la morfología de las diferentes células sanguíneas.

MATERIAL NECESARIO

• Bote de orina ("contenedor de desechos").
• Vaso de precipitados.
• Lancetas.
• 3 portaobjetos por persona.
• Papel y alcohol 96º.
• Capilares heparinizados.
  

PROCEDIMIENTO

1. En primer lugar, debemos rotular cada uno nuestros 3 portaobjetos.
   
2. A continuación, desinfectar con alcohol y papel la zona donde se va a realizar la punción (preferiblemente por el lateral de un dedo de la mano) y secar.
3. Proceder la punción de la yema del dedo con la lanceta.
4. Recoger la sangre capilar con un capilar heparinizado.
5. Seguidamente, depositar en el extremo de un portaobjetos una gota de sangre (2-5 microlitros) desde el capilar heparinizado que contiene la sangre capilar.
6. Coger rápidamente otro portaobjetos con la mano derecha y realizar la técnica de la cuña:
1.  Con éste portaobjetos se hace contacto con la gota de sangre manteniendo una inclinación de unos 45º y llevándolo hacia atrás, la sangre alcanza por capilaridad todo el ancho del porta.
   Nota: Es aconsejable que la sangre no llegue a los lados del porta sobre el que se realizará la
   extensión
2. Se arrastrará con movimiento uniforme y a una velocidad media por todo el porta donde se depositó la sangre.
   Nota: El deslizamiento debe acabar a 1cm del extremo final con un
   movimiento de ascensión del porta extensor.
7. Una vez hemos realizado el frotis se deja secar a temperatura ambiente y en posición horizontal (mínimo 30 minutos), para que sus células no se distorsionen.

RESULTADOS

ERRORES Y FALLOS

• A casi todos los alumnos no nos ha salido en condiciones el frotis sanguíneo, ya sea por:
• La presentación de estrías que puede deberse a que el portaobjetos utilizado para hacer la extensión no tenía los bordes esmerilados, o no estaba bien limpio.
• Debido a que las gotas de sangre de algunos han sido pequeñas, lo que ocasiona que la extensión sea demasiada corta.
• Debido al exceso de cantidad de sangre depositada en el porta, lo que da lugar a una ausencia de la zona deshilachada, ya que se llega al extremo del porta sin que la extensión esté terminada.
• También, y sobre todo, ha habido muchas extensiones con los extremos finales muy desflecados.

OBSERVACIONES

• El grosor de la extensión obtenida depende de la cantidad de sangre en la gota, de la concentración de Hb y de la velocidad con que esta se ha realizado.
• Con un ángulo superior a 45º, la extensión será gruesa y corta, con uno inferior será larga y fina. A mayor velocidad, mayor grosor.
• Una buena extensión debe de tener entre 3 y 4 cm de longitud. 

PARTES DE UN FROTIS
- Cabeza: Zona inicial de la extensión donde existe una gran porción de linfocitos y hematíes.
- Cuerpo: Es la zona media del frotis, su espesor es el apropiado y en ella existe una adecuada
proporción entre los distintos tipos de leucocitos. Contiene la zona “ideal” de observación que
corresponde a la porción que limita con la cola.
- Cola: Es la zona final de la extensión, suele tener aspecto redondeado, es la región mas fina. En los
bordes finales las células son más difíciles de reconocer por estar deformadas o destruidas.